Πουρίνες Πυριμιδίνες
Σκοπός
Οι Πουρίνες (Αδενίνη, Γουανίνη, Ξανθίνη, Υποξανθίνη) και οι Πυριμιδίνες (Ουρακίλη, Θυμίνη, Κυτοσίνη Οροτικό οξύ), υπεισέρχονται στο σύνολο των βιολογικών αντιδράσεων. Χρησιμεύουν στην αποθήκευση την μεταγραφή και μετάφραση της γενετικής πληροφορίας (RNA, DNA).
Προέρχονται κυρίως από ενδογενή σύνθεση και λιγότερο από τη διατροφή.
Κλινική χρησιμότητα
- Η εκτίμηση ασθενών ύποπτων για διαταραχές Πουρινών Πυριμιδινών.
- Η παρακολούθηση ασθενών με αντίστοιχα μεταβολικά νοσήματα.
- Η εργαστηριακή διερεύνηση πρωτοπαθούς ή δευτεροπαθούς Υπερουρικαιμίας.
Ενδείξεις ελέγχου
- Σήμερα είναι γνωστά τουλάχιστον 35 νοσήματα που σχετίζονται με τον μεταβολισμό των Πουρινών Πυριμιδινών.
- Το κλινικό φάσμα των διαταραχών αυτών είναι εξαιρετικά ευρύ και μπορεί να περιλαμβάνει Νευρολογική συνδρομή, Ανοσολογικές, Αιματολογικές και Νεφρολογικές αλλοιώσεις.
Αρχή της μεθόδου
Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Πιέσεως- Δίδυμη Φασματομετρία Μάζης(UPLC-Tandem MS).
Προετοιμασία του ασθενούς-Δειγματοληψία
- Συλλογή ούρων 24 ωρών
- Συλλογή δείγματος μίας ούρησης.
Διατήρηση των δειγμάτων στην κατάψυξη μέχρι την μεταφορά στο εργαστήριο.
- Μέγιστος χρόνος για αποστολή στο εργαστήριο: 24 ώρες
- Ελάχιστη απαιτούμενη ποσότης δείγματος: 1 ml.
- Συνθήκες μεταφοράς: σε ξηρό πάγο ή με παγοκύστες.
Διαχείριση αποτελεσμάτων
- Πραγματοποίηση αναλύσεως : Δευτέρα έως Παρασκευή .
- Χρόνος αναφοράς αποτελεσμάτων : 5 ημέρες από την λήψη του δείγματος.
- Χρόνος συντήρησης των δειγμάτων στο εργαστήριο : 2 μήνες.
Τιμές αναφοράς Στον πίνακα 1 παρουσιάζονται οι φυσιολογικές τιμές Πουρινών/ Πυριμιδινών ανά μεταβολίτη (mmol/mol Κρεατινίνης) και κατά ηλικία.
| 0-1 έτος | 1-5 έτη | έτη | >16 έτη | |
| 2,8 Dihydroxy adenine | 0-5.9 | 0-6.0 | 0.1.2 | 0.22 |
| SAICAR | 0-2.0 | 0-0.9 | 0 | 0-0.3 |
| Urate | 820-1026 | 527-790 | 326-436 | 222-287 |
| Hypoxanthine | 1-71.9 | 1-88.1 | 1-14.1 | 1-14 |
| Xanthine | 0-63.4 | 0-54.7 | 0-21.7 | 0.3-10.7 |
| Adenine | 0-4.8 | 0-2.8 | 0-0.9 | 0-0.6 |
| AICAR | 0-4.5 | 0-3.0 | 0-1.7 | 0-1.6 |
| Inosine | 0-6.1 | 0-4.5 | 0-1.2 | 0-0.6 |
| Guanosine | 0-2.7 | 0-1.2 | 0 | 0 |
| Deoxyguanosine | 0 | 0 | 0 | 0 |
| Deoxyinosine | 0-2.7 | 0-1.2 | 0 | 0 |
| SAdo | 0.1-15.80-11.7 | 0-4.9 | 0-2.8 | 0-7 |
| Adenosine | 0-4.4 | 0-4.7 | 0-3.9 | 0-2.8 |
| Deoxyadenosine | 0-3.0 | 0-4.7 | 0 | 0-0.6 |
| Orotidine | 0-10.1 | 0-7.8 | 0.2-1.8 | 0-2.1 |
| Orotate | 0-1.4 | 0-3.0 | 0-2.5 | 0-2.0 |
| Dihydroorotate | 0-18.6 | 0-16 | 0-8.6 | 0-3.9 |
| Dihydrouracil | 0-29.6 | 0-8.1 | 0-3.7 | 0-2.6 |
| Uracil | 0-100.9 | 0-66.6 | 0-16.1 | 0-9.7 |
| 5OH-Me-uracil | 0-4.9 | 0-10.1 | 0-2.0 | 0-3.6 |
| Pseudouridine | 26.5-216.5 | 17.7-134.6 | 16-56.9 | 10.2-43.5 |
| Uridine | 0-6.8 | 0-2.1 | 0-1.6 | 0-1.1 |
| Dihydrothymine | 0-10.3 | 0-4.6 | 0-3.0 | 0-1.1 |
| Thymine | 0-8.0 | 0-4.2 | 0-1.6 | 0-0.9 |
| Deoxyuridine | 0-3.0 | 0-1.7 | 0-0.6 | 0 |
| Thymidine | 0-1.1 | 0-0.9 | 0 | 0 |
Ποιοτικός έλεγχος
Το εργαστήριο εφαρμόζει εξωτερικό ποιοτικό έλεγχο με δείγματα προερχόμενα από ανεξάρτητο κατασκευαστή : European Research Network for Diagnosis and treatment of Inherited disorders of Metabolism (ERNDIM)
Συμμετέχει στα παρακάτω Διεργαστηριακά προγράμματα Ποιοτικού ελέγχου του ERNDIM:
- Purines Pyrimidines in Urine
Επεξήγηση αποτελεσμάτων- Αναφορά
Για την ορθή αξιολόγηση των αποτελεσμάτων είναι απαραίτητη η συμπλήρωση Ιστορικού , το οποίο πρέπει να περιλαμβάνει :
- Ηλικία του ασθενούς.
- Σε περίπτωση νεογνού, το βάρος γεννήσεως και την ηλικία κυήσεως.
- Άλλες Κλινικές πληροφορίες (συμπτώματα, πιθανή υποψία νοσήματος).
- Φαρμακευτική αγωγή.
- Διατροφή.
Τα αποτελέσματα του ποσοτικού προσδιορισμού των Πουρινών Πυριμιδινών, συνεκτιμώνται συνήθως με άλλες εργαστηριακές αναλύσεις Μεταβολικού ελέγχου.
Σε περίπτωση παθολογικού αποτελέσματος, δίνεται αναφορά με λεπτομερή επεξήγηση των αποτελεσμάτων και της σημασίας τους, στοιχεία διαφορικής διάγνωσης και προτάσεις για περαιτέρω συμπληρωματικές διαγνωστικές εξετάσεις.
Βιβλιογραφία
- Monostori P et all (2019) Extended diagnosis of purine and pyrimidine disorders from urine:LC MS/MS assay development and clinical validation. PLOS ONE 14(2): e0212458
- Jorgen Bierau and Ivan Sebesta :Purine and Pyrimidine Disorders p. 641 in
Physician Guide to the Diagnosis, Treatment and Follow-Up of Inherited Metabolic Diseases. Springer 2014
